Chimärismus & MRD

Ziel einer Transplantation ist es, das Blutbildungssystem des Empfängers zu verdrängen und durch das des Spenders dauerhaft zu ersetzen. Stammen alle blutbildenden Zellen vom Spender, so liegt ein vollständiger Chimärismus vor. Bei bösartigen Erkrankungen wie Leukämien ist der Erhalt eines vollständigen Chimärismus assoziert mit einem geringeren Rückfallrisiko.

• Mit der Chimärismusanalyse können in einer Blut- oder Gewebeprobe für Spender und Empfänger charakteristische Mikrosatelliten-Profile nachgewiesen werden.
   
• Durch Untersuchung von (mittels MACS-Beads angereicherten) Subzellfraktionen lässt sich die Nachweisgrenze der angewandten Methode erweitern.
   
• Benötigtes Probenmaterial:
  Benötigt werden einmalig Referenzproben des Spenders und des Empfängers (vor Transplantation). Die Probenmenge für eine Verlaufsuntersuchung richtet sich nach der Anzahl der Subzellfraktionen
  (2 ml EDTA-PB/angeforderte Untersuchung).
  Das Ergebnis (Empfängeranteil %) ist in der Regel ein bis zwei Arbeitstage nach Probeneingang verfügbar.
   
• Gerne stehen Ihnen Prof. Bader und Dr. Kreyenberg für weitere Fragen zur Verfügung.

Die akute lymphatische Leukämie (ALL) ist die häufigste maligne Erkrankung im Kindesalter. Der Erfolg einer Therapie ist mit der dauerhaften Elimination leukämischer Zellen unterhalb der mikroskopischen Nachweisgrenze verbunden.

Die Standardmethode für die Untersuchung BCR-ABL negativer ALL ist die Detektion patientenspezifischer somatisch neukombinierter Immunglobulin(Ig)- und T-Zell-Rezeptor(TCR)-Gene. Das Verfahren erfolgt in zwei Schritten:

1. Charakterisierung neukombinierter Abschnitte und Design komplementärer PCR-Primer

2. MRD-Nachweis in der Verlaufsprobe mittels quantitativer PCR

Benötigtes Probenmaterial:
Benötigt wird einmalig eine Diagnoseprobe der Leukämie (als Referenz). Die erforderliche Probenmenge ist 5 ml EDTA-KM oder 10 ml EDTA-PB.
Das Ergebnis einer Verlaufsuntersuchung (log-Reduktion im Vergleich zur Referenzprobe) ist in der Regel zwei bis vier Arbeitstage nach Probeneingang verfügbar.

• Identitätsanalysen (beispielsweise von Zellkulturen oder Tumorproben)
• CAR-T-Zellbestimmung mittels qPCR
• GATA1 Mutationsanalyse mittels NGS

• Zellaufreinigung mittels MACS-Verfahren
• Real-Time-PCR, konventionelle PCR-Systeme, Reverse Transkriptase-PCR, Sequenzierung

• EuroMRD network
• European Scientific foundation for Laboratory Hemato Oncology (ESLHO)

• Publikationen Arbeitsgruppe Prof. Bader